Enterobacter aerogenes en andere soorten van Enterobacteriaceae zijn gemakkelijk te herkennen met behulp van de API-20E testkit. Deze kit, vervaardigd door bioMeriuex Inc., bevat 20 mini-buizen of putten voor de test. De test bestaat uit het enten van een zuivere bacteriële suspensie in de test putjes en het lezen van de reacties van de kleur die zich voordoen. Identificatie, is afhankelijk van de omzetting van de resultaten van deze kleur reacties in een zeven-cijferige code genoemd de analytische Index van het profiel. Matching van deze code met de fabrikant database biedt een identificatie van het organisme.
Wat die u nodig hebt
- Enterobacter aerogenes reincultuur
- Ampul met 5 ml van natriumchloride 0,85 procent medium
- Pipetteer
- Incubatie vak
- Gedeïoniseerd of gedestilleerd water
- Minerale olie
- Incubator
- Druktoetsen telefoon
Isoleren van de organisme die u wenst te identificeren op de voedingsbodem specifieke voor Enterobacteriaceae. Gebruik de API 20E testkit alleen met zuivere culturen en niet rechtstreeks op de gemengd-cultuur monsters.
Open een ampul met 5 ml van natriumchloride 0,85 procent medium. Verwijder een één kolonie uit een 18 - tot 24-uur-oud isolatie-plaat met een pipet en toe te voegen in de ampul. Mix te verkrijgen van een homogene suspensie. Gebruik deze schorsing zodra u klaar bent met het opstellen van het.
Instellen van een incubatie-vak dat uit honingraatmotief putten in een dienblad voorzien van een deksel bestaat. Open het en voeg 5 ml gedeïoniseerd of gedestilleerd water in de lade putten. De strip waarin de API 20E testkit uitpakken, en plaats deze in het incubatie-vak.
De buis en het napje van de putten gemarkeerd "GEL", "VP" en "CIT" met de vering die u hebt voorbereid. In de overige wells, vult u de bacteriële suspensie in de buis, maar niet het napje. Toevoegen van minerale olie in de putjes gemarkeerd "ADH," "ODC," "LDC," "URE" en "H2S" een anaerobe omgeving te creëren.
Bedek de incubatie-doos met het deksel, en incuberen bij een temperatuur tussen de 34 en 38 graden Celsius gedurende 18 tot 24 uur.
Observeren van de putten en Let op de reacties op het blad van de resultaten. Mits een minimum van drie tests positief zijn, gaat u verder met de reacties van de kleur met behulp van de chemische testoplossingen, of de reagentia, die bij de kit geleverd. Voeg één druppel TDA reagens in de goed gemarkeerde "TDA" en een druppel elke VP1 en VP2 reagentia in goed gemarkeerd "VP." Als minder dan drie tests kwam positief, Incubeer de strips nog eens 24 uur voordat u deze reagentia toevoegt.
Observeer de kleurwijzigingen geproduceerd in de putjes. Een roodachtig bruine kleur in TDA geeft een positieve reactie. Wacht 10 minuten na het toevoegen van reagentia uit de kit in VP1 en VP2. Overwegen een rode of roze kleur als positief en een bleke roze kleur verschijnen na 10 minuten als negatief.
Een druppel van het reagens JAMES uit de testkit toevoegen aan de goed gemarkeerde "IND." Een roze kleur in de gehele napje beschouwen als een positieve reactie.
Detest oxidase als opgegeven door de fabrikant van de kit en de resultaten samen met de resultaten van de vorige 20 tests registreren.
Gebruik de leestafel voorzien van de testkit waarden toewijzen voor de waargenomen in elk van de test putjes reacties. Deze waarden toevoegen zoals voorgeschreven om het verkrijgen van de nummer zeven cijfers profiel.
Doorwerken in dit nummer zeven cijfers profiel in van de fabrikant van de kit database druktoetsen telefoon. Wachten op de identificatie die is verstrekt door de database. Als het profiel nummer geen concrete resultaten biedt, voert u de aanvullende tests geven door de fabrikant van de kit.
